Proveedores con licencias comerciales verificadas
Proveedor Auditado 
[Uso previsto]
El kit de detección de ácido nucleico del virus de la viruela del mono (PCR por fluorescencia) se utiliza para la detección de ácido nucleico del virus de la viruela del mono en muestras de exantema pustular o vesicular en suero y en muestras de erupción vesicular en humanos de individuos sospechosos de infección por el virus de la viruela del mono. Al detectar específicamente los fragmentos de ácido nucleico del virus de la viruela del mono, el virus de la viruela del mono puede identificarse rápidamente, lo cual es adecuado para el diagnóstico rápido de enfermedades relacionadas causadas por la infección por el virus de la viruela del mono.
[Especificación de embalaje]
25 test/caja, 50 tests/caja
| NO | Componentes | 25tests/kit | 50tests/kit | Componentes principales |
| 1 | Mezcla de detección de MPV-PCR | 950μL/tubo, 1tube | 950μL/tubo, 2 tubo | Cebadores, sondas, dNTPs, tampón PCR, etc. |
| 2 | Mezcla de la enzima MPV | 50μL/tubo,1tube | 100μL/tubo, 1tube | H-Taq, UNG |
| 3 | Producto de control MPV-positivo | 500μL/tubo,1tube | 500μL/tubo,1tube | Clonación de plásmidos para fragmentos de genes diana |
| 4 | Producto de control MPV-negativo | 500μL/tubo,1tube | 500μL/tubo,1tube | Solución salina esterilizada |
Nota:
1.los kits con números de lote diferentes no son intercambiables.
2.todas las muestras biológicas del kit se han extinguido.
[Requisito de muestra]
1.Tipo de muestra
Muestras de suero y de erupción pustular o vesicular humana.
2.recogida de muestras
Suero: Utilice una jeringa estéril para extraer 2ml de los sujetos de sangre venosa, inyectarla en un tubo de recogida estéril, dejarla a temperatura ambiente durante no más de 4 horas, esperar a que la muestra separe el suero, O centrifugar a 4000 rpm durante 5 minutos a temperatura ambiente para separar el suero y transferirlo a un tubo de centrífuga de repuesto estéril 1,5ml recogida de muestras de vesículas y pústulas: Seleccione vesículas o pústulas frescas en la piel, desinfecte con yodóforo y, a continuación, limpie el yodóforo con alcohol al 70%. Después de que el alcohol se evapore por completo, utilice una aguja estéril para perforar y exprimir el líquido de tejido, sumerja el hisopo de algodón en el líquido, coloque rápidamente el hisopo de algodón en el tubo de muestreo de 3-5 ml que contiene la solución de preservación, rompa el hisopo de algodón cerca de la parte superior, apriete la tapa del tubo y séllela para su inspección.
3. Almacenamiento y envío de muestras
Las muestras recogidas deben enviarse inmediatamente para su análisis. Las muestras deben analizarse en un plazo de 24 horas si se almacenan a una temperatura de entre 2 y 8 ºC. Las muestras que no puedan analizarse en un plazo de 24 horas deben almacenarse a -70 C o menos (en ausencia de condiciones de almacenamiento de -70 °C, las muestras pueden almacenarse a -25 °C a -15 °C durante 10 días). Deben evitarse múltiples ciclos de congelación/descongelación. Los especímenes deben transportarse en una jarra congelada sellada con hielo o en una caja de espuma sellada con hielo.
[Método de prueba]
Lea las instrucciones del kit de prueba antes de utilizarlo.
1.preparación de reactivos (en el área de preparación de reactivos)
1,1 saque los componentes de la caja y colóquelos a temperatura ambiente. Después de que la temperatura se equilibre a la temperatura ambiente, mezclar bien y centrifugar brevemente para su uso posterior. Según el número de muestras que se van a analizar, los controles negativos y los controles positivos, tomar la cantidad correspondiente de componentes en proporción (38μL/persona de solución de reacción de MPV-PCR + 2μL/persona de mezcla de MPV-enzima), y mezclar bien para formar una mezcla de PCR. Liquid-1, que se utilizó después de la centrifugación instantánea.
1,2 transfiera los reactivos preparados anteriormente a la zona de procesamiento de muestras para su uso.
2.procesamiento de muestras (en el área de procesamiento de muestras)
2,1 Extracción de la muestra:
El kit de extracción de ácidos nucleicos debe usarse para la extracción de muestras.
El control negativo, el control positivo y las muestras que se van a analizar se procesan simultáneamente.
2,2 Añada la muestra
Añadir 10μL de ADN extraído a los tubos de PCR en el siguiente orden: Control negativo de MPV, control positivo de MPV y muestra a analizar. Añada 40μL de mezcla maestra de MPV a cada pocillo. Cada pozo fue tapado, centrifugado a 2000 rpm durante 10 segundos, y colocado en una máquina de PCR fluorescente.
3.amplificación de PCR (en el área de amplificación y análisis)
Consulte el manual de instrucciones de cada instrumento para conocer los ajustes.
3,1 colocar los tubos de reacción de PCR que hayan terminado de añadir muestras en el instrumento de PCR de fluorescencia, ajustar los orificios de ensayo de acuerdo con la secuencia correspondiente de adición de muestras, fijar los orificios de ensayo para productos de control de calidad positivos, productos de control de calidad negativos y muestras desconocidas, y establecer el nombre de la muestra.
3,2 sistema de reacción total: 25μL
3,3 selección del canal de detección de fluorescencia:1) Seleccione el canal FAM (Reporter: FAM, Quencher: None) para detectar los genes diana del virus de la viruela del mono: 2) Seleccione el canal HEX o VIC (Reporter: HEX/VIC, Quencher: None); 3)establezca la fluorescencia de referencia (referencia pasiva) en none; establezca el volumen de muestra en 50.
3,4 ajuste de parámetros cíclicos:
Nota: Utilice el instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia ABI 7500 REA-Time y elija "Ninguno" en referencia pasiva y en el dispositivo de enfriamiento.
4.Análisis de resultados
Después de la reacción, los resultados se guardarán automáticamente y la línea de base y el umbral de cada canal de detección se ajustarán de acuerdo con las imágenes analizadas. Haga clic en "Análisis" para realizar el análisis y hacer que todos los parámetros cumplan los requisitos del control de calidad, y luego compruebe los resultados de detección de cada muestra desconocida.
5.Control de calidad
Productos de control negativos: La curva FAM no tiene valor CT o CT>40; y la detección estándar interna del virus de la viruela del mono (HEX/VIC) no tiene valor CT o CT>40.
Productos de control positivo: Curva FAM CS35; y la detección de virus de la viruela del mono (HEX/VIC) es positiva, CT≤35.
si los dos elementos anteriores se cumplen al mismo tiempo en la misma inspección, de lo contrario, la segunda inspección se considerará inválida y se requerirá una nueva inspección.
[Valor de referencia positivo]
Mediante el estudio de los valores de referencia, se determinó que el valor de referencia de la TC del gen diana detectado por este kit era 40, y el valor de referencia de la TC del patrón interno era 40.
[Interpretación de los resultados de la prueba]
1.valor CT de detección de FAM ≤ 40, y la detección estándar interna es positiva (valor CT ≤ 40), según se informa como positivo para virus de la viruela del mono;
2.no hay valor CT o valor CT > 40 en la detección FAM, y la detección interna estándar del canal es positiva (valor CT ≤ 40), y el informe es negativo para el virus de la viruela del mono;
3.lf no hay valor CT o valor CT > 40 en la prueba estándar interna, el resultado de la prueba de la muestra no es válido. La causa debe ser encontrada y eliminada, y la muestra debe ser muestreada nuevamente y probada (si el resultado de la prueba repetida sigue siendo inválido, por favor contacte a la compañía).
4.para las muestras positivas, no se requiere el resultado de la prueba estándar interna; para las muestras negativas, la prueba estándar interna debe ser positiva. lf la prueba estándar interna es negativa, el resultado de la prueba de la muestra no es válido. Se vuelven a muestrear las muestras y se realizan experimentos repetidos (si los resultados de los ensayos repetidos siguen siendo inválidos, póngase en contacto con nuestra empresa).
[Valor de referencia positivo]
Mediante el estudio de los valores de referencia, se determinó que el valor de referencia de la TC del gen diana detectado por este kit era 40, y el valor de referencia de la TC del patrón interno era 40.
[Interpretación de los resultados de la prueba]
1.valor CT de detección de FAM ≤ 40, y la detección estándar interna es positiva (valor CT ≤ 40), según se informa como positivo para virus de la viruela del mono;
2.no hay valor CT o valor CT > 40 en la detección FAM, y la detección interna estándar del canal es positiva (valor CT ≤ 40), y el informe es negativo para el virus de la viruela del mono;
3.lf no hay valor CT o valor CT > 40 en la prueba estándar interna, el resultado de la prueba de la muestra no es válido. La causa debe ser encontrada y eliminada, y la muestra debe ser muestreada nuevamente y probada (si el resultado de la prueba repetida sigue siendo inválido, por favor contacte a la compañía).
4.para las muestras positivas, no se requiere el resultado de la prueba estándar interna; para las muestras negativas, la prueba estándar interna debe ser positiva. lf la prueba estándar interna es negativa, el resultado de la prueba de la muestra no es válido. Se vuelven a muestrear las muestras y se realizan experimentos repetidos (si los resultados de los ensayos repetidos siguen siendo inválidos, póngase en contacto con nuestra empresa).
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