1. Manipulación de muestras
1) El tratamiento del tejido: cortar pequeños trozos de tejido y agregar PBS correspondiente o del 0,9% solución salina normal,
Rectificar el tejido a fondo con homogeneizador, centrifugate eléctrico y el sobrenadante
Para el segundo paso de la lisis.
2) Un hisopo de algodón de transferencia de tratamiento: el hisopo arrasó en la garganta, nariz y otras piezas para 2ml
Tubo de centrífuga, agregue una cantidad adecuada de PBS (200 μl de PBS remojar durante la noche es mejor), tome la
El sobrenadante para el segundo paso de la lisis.
3) células de la lisis directa: método: el segundo paso de la lisis se lleva a cabo inmediatamente.
2. Tome 200 μl de la muestra después de la primera etapa del tratamiento, añadir 200 μl de tampón GTC, Vortex
Agitando por 30s, el baño de agua de 56 ºC durante 10min.
3. Añadir 250 μl de calidad farmacéutica nacional isopropanol y dejar reposar durante 5 minutos a temperatura ambiente.
Transferir todas las soluciones a la columna de adsorción, centrifugate a 12000rpm durante 1min.
Deseche el líquido residual en el tubo de recolección y poner la columna de adsorción en la
Tubo de recolección de nuevo.
4. Añadir 600 μl lavar búfer en la columna de adsorción, centrifugate a 12000rpm durante 1min.
Deseche el líquido residual en el tubo de recolección, y luego poner la columna de adsorción en la
Tubo de recolección de nuevo.
5. Repita el paso 4.
6.Poner la columna de adsorción en la colección del tubo y centrifugate a 12000rpm durante 2min.
Nota: los pasos no debe omitirse para asegurarse de que el residual de la solución de limpieza
Se retira de la columna de adsorción.
Colocar la columna de adsorción en un tubo de centrífuga de 1,5 ml limpia, abra la tapa de la adsorción
La columna, dejarlo a temperatura ambiente durante 2 minutos, añadir 30-50μl de la adsorción del búfer de eluyente
La columna, dejarlo a temperatura ambiente por 2-5min. y centrifugate a 12000rpm en 2min
La obtención de ácido nucleico viral. Almacenamiento a corto plazo a -80 °C.